製備(bèi)液(yè)相色譜時(shí),溶於流(liú)動相(xiāng)中(zhōng)的各組(zǔ)分(fēn)經(jīng)過固定(dìng)相時(shí),由(yóu)於(yú)與固定相發生(shēng)吸(xī)附(fù),分(fēn)配,離子吸(xī)引,排(pái)阻(zǔ),親等(děng)作(zuò)用,大小(xiǎo),強弱(ruò)不同(tóng),在(zài)固定相中(zhōng)滯(zhì)留時(shí)間(jiān)不同(tóng),從而先(xiān)後(hòu)從(cóng)固定(dìng)相(xiāng)中(zhōng)流(liú)出。又稱為(wéi)色層法,層(céng)析(xī)法。
按(àn)兩相的(dí)物理狀(zhuàng)態(tài)可(kě)分(fēn)為:氣(qì)相(xiāng)色譜法(fǎ)(GC)和(hé)液(yè)相色譜(pǔ)法(LC)。氣(qì)相色(sè)譜(pǔ)法適(shì)用於(yú)分離揮(huī)發性化合物(wù)。GC根(gēn)據(jù)固定相不(bù)同(tóng)又(yòu)可(kě)分(fēn)為(wéi)氣固色(sè)譜(pǔ)法(fǎ)(GSC)和氣(qì)液(yè)色譜法(GLC),其(qí)中以(yǐ)GLC應(yīng)用廣。
製備液相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)法適(shì)用於(yú)分(fēn)離(lí)低(dī)揮發性或非(fēi)揮(huī)發性,熱穩(wěn)定(dìng)性(xìng)差的物質(zhì)。LC同樣(yàng)可(kě)分(fēn)為液固(gù)色譜法(fǎ)(LSC)和(hé)液(yè)液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體(tǐ)色譜法(fǎ)(SFC),它(tā)以超臨(lín)界流(liú)體(界於氣(qì)體(tǐ)和液體(tǐ)之間(jiān)的(dí)一種(zhǒng)物(wù)相(xiāng))為(wéi)流(liú)動相(常用CO2),因其(qí)擴(kuò)散係數大,能很(hěn)快達到平衡,故分析時(shí)間短,適用於手(shǒu)性(xìng)化合物的(dí)拆(chāi)分。
按原理分(fēn)為吸(xī)附色譜(pǔ)法(AC),分配(pèi)色(sè)譜法(DC),離子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)色(sè)譜(pǔ)法(fǎ)(IEC),排阻色譜(pǔ)法(EC,又(yòu)稱分子篩,凝膠過(guò)濾(GFC),凝膠(jiāo)滲(shèn)透色(sè)譜(pǔ)法(GPC)和(hé)親和色譜(pǔ)法(fǎ)。按操作形式可(kě)分為紙色(sè)譜(pǔ)法(PC),薄(báo)層色(sè)譜(pǔ)法(fǎ)(TLC),柱色譜法。
1,液固色(sè)譜法:
使(shǐ)用固體(tǐ)吸附劑,被(bèi)分離(lí)組(zǔ)分(fēn)在(zài)色(sè)譜(pǔ)柱上(shàng)分離(lí)原理是根據(jù)固定(dìng)相對組分吸(xī)附(fù)力大(dà)小(xiǎo)不同(tóng)而(ér)分離。分(fēn)離過程(chéng)是(shì)一個吸附-解吸附的(dí)平衡(héng)過程(chéng)。常用(yòng)的吸(xī)附(fù)劑為(wéi)矽(guī)膠(jiāo)或(huò)氧化鋁(lǚ),粒(lì)度(dù)5~10μm。適用(yòng)於(yú)分(fēn)離(lí)分子量(liáng)200~1000的(dí)組分,大多(duō)數(shù)用於非(fēi)離子型化合物,離子型化(huà)合物易(yì)產生拖尾。常(cháng)用於分離同分(fēn)異構(gòu)體。
2,液液色(sè)譜法:
使用(yòng)將(jiāng)特定的液態(tài)物質塗於擔體表麵,或化(huà)學鍵合(hé)於擔體表(biǎo)麵而形(xíng)成的固(gù)定(dìng)相,分(fēn)離原理是根據(jù)被分離的組(zǔ)分(fēn)在(zài)流(liú)動相(xiāng)和(hé)固(gù)定相中(zhōng)溶解(jiě)度(dù)不同(tóng)而(ér)分(fēn)離。分離(lí)過程是一(yī)個(gè)分配平(píng)衡(héng)過程。