蛋白層析柱(zhù)是凝(níng)膠層析技(jì)術中的主(zhǔ)體，我(wǒ)們(mén)研究所用(yòng)的就是(shì)同(tóng)興玻璃儀(yí)器，一(yī)般(bān)用玻璃管或(huò)有機玻(bō)璃管。根(gēn)據(jù)樣品混(hùn)合(hé)物中(zhōng)各(gè)組分在固定(dìng)相和(hé)流動相中分(fēn)配係(xì)數不(bù)同，從而分(fēn)離的(dí)一種層析(xī)法(fǎ)。
蛋白(bái)層析柱是凝膠層(céng)析(xī)技術(shù)中(zhōng)的主體(tǐ)，一(yī)般(bān)用(yòng)玻璃管(guǎn)或有(yǒu)機(jī)玻璃管。層析柱的直(zhí)徑(jìng)大小不影響分(fēn)離度，樣(yàng)品(pǐn)用量大，可加大(dà)柱(zhù)的直徑(jìng)，一(yī)般(bān)製備(bèi)用凝膠柱(zhù)，直(zhí)徑大於(yú)2厘米(mǐ)，但在加樣時(shí)應將(jiāng)樣品均匀(yún)分布於(yú)凝膠(jiāo)柱床麵上。此(cǐ)外(wài)，直徑加大(dà)，洗(xǐ)脫液(yè)體(tǐ)體積(jī)增加(jiā)，樣品稀釋(shì)度(dù)大。
層析柱的直徑大(dà)小(xiǎo)不影響(xiǎng)分(fēn)離度，樣品(pǐn)用量大，可加大(dà)柱的直徑，一(yī)般製備用凝膠(jiāo)柱(zhù)，直(zhí)徑(jìng)大於(yú)2厘(lí)米，但在加(jiā)樣(yàng)時應(yīng)將(jiāng)樣品均匀分布於凝(níng)膠柱床麵上(shàng)。此外(wài)，直(zhí)徑(jìng)加大(dà)，洗(xǐ)脫液體(tǐ)體(tǐ)積增加，樣品稀(xī)釋(shì)度(dù)大。分(fēn)離度(dù)取(qǔ)決於柱高(gāo)，為(wéi)分(fēn)離不同組(zǔ)分(fēn)，凝膠柱(zhù)床要(yào)有(yǒu)適宜的高度，分(fēn)離度(dù)與柱高的平方(fāng)根相關，但(dàn)由(yóu)於(yú)軟凝膠(jiāo)柱(zhù)過(guò)高擠壓變(biàn)形(xíng)阻塞(sāi)，一般不超(chāo)過(guò)1米(mǐ)。
注(zhù)意事項(xiàng)：
1，各(gè)接(jiē)頭(tóu)不能漏氣，連接(jiē)用的小(xiǎo)乳(rǔ)膠管不要有破(pò)損(sǔn)，否(fǒu)則造(zào)成(chéng)漏(lòu)氣(qì)，漏液(yè)。
2，裝(zhuāng)柱要均(jūn)匀，既不過(guò)鬆，也(yě)不過(guò)緊(jǐn)，要(yào)在(zài)要求的操作(zuò)壓下裝(zhuāng)柱，流(liú)速(sù)不(bù)宜(yí)過快(kuài)，避免因(yīn)此(cǐ)壓緊凝(níng)膠(jiāo)。
3，始(shǐ)終(zhōng)保持柱(zhù)內液(yè)麵高(gāo)於(yú)凝膠(jiāo)表麵，否(fǒu)則水分(fēn)蒸(zhēng)發，凝(níng)膠(jiāo)變(biàn)幹。也(yě)要防(fáng)止(zhǐ)液體(tǐ)流幹(gān)，使凝(níng)膠混入(rù)大(dà)量(liáng)氣泡(pào)，影響(xiǎng)液(yè)體(tǐ)在(zài)柱(zhù)內的(dí)流動(dòng)。
4，所用凝膠(jiāo)比(bǐ)較昂(áng)貴，需小心(xīn)操(cāo)作(zuò)，實(shí)驗後(hòu)回收(shōu)，盡量避(bì)免浪(làng)費(fèi)和損(sǔn)失(shī)。
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