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製(zhì)備液相(xiāng)色譜係統的組(zǔ)成部(bù)分和原理(lǐ)

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  製(zhì)備液相(xiāng)色譜係統(tǒng)是(shì)一種用於生物(wù)學,基(jī)礎醫(yī)學(xué),預防醫(yī)學(xué)與公共衛生(shēng)學,藥學(xué)等(děng)領域(yù)的先(xiān)進分析儀(yí)器(qì)。該(gāi)係統(tǒng)基(jī)於(yú)液(yè)相(xiāng)色(sè)譜(pǔ)的原理(lǐ),通過(guò)高(gāo)壓(yā)驅(qū)動(dòng)流(liú)動(dòng)相(xiāng)通過填(tián)充有固(gù)定(dìng)相的色譜(pǔ)柱,利(lì)用樣(yàng)品(pǐn)中(zhōng)各組分在固定相和流動相中的吸附(fù),分配,離子交換等作(zuò)用(yòng)的差異(yì),實現對復雜樣品(pǐn)中(zhōng)各(gè)組(zǔ)分(fēn)的分離(lí)和純化。
 
  製備(bèi)液相色(sè)譜係統主要由(yóu)以下幾(jī)個部分(fēn)組(zǔ)成(chéng):
 
  1. 高壓泵:負(fù)責將流動相(xiāng)以高壓(yā)形式(shì)輸送到色(sè)譜柱。高壓泵的性能(néng)直接影響(xiǎng)到(dào)整(zhěng)個(gè)係統(tǒng)的(dí)分(fēn)離效果(guǒ)和穩(wěn)定(dìng)性。常(cháng)見(jiàn)的高(gāo)壓泵有恒流泵,梯度泵等。
 
  2. 色譜(pǔ)柱:實(shí)現樣品分離(lí)的關(guān)鍵(jiàn)部(bù)件(jiàn),其內部(bù)填充有固定(dìng)相(xiāng)。固定相可(kě)以是(shì)矽(guī)膠(jiāo),聚(jù)合物,離(lí)子交換樹(shù)脂等(děng)。根(gēn)據固(gù)定相的性質和作用力,色(sè)譜柱可(kě)以(yǐ)分為正(zhèng)相(xiāng)色譜柱,反相色譜柱,離(lí)子交(jiāo)換(huàn)色譜柱等。
 
  3. 檢(jiǎn)測器:用於檢測經過色(sè)譜柱(zhù)分(fēn)離後(hòu)的樣品組(zǔ)分,並將(jiāng)其轉(zhuǎn)化(huà)為(wéi)電信(xìn)號(hào)。常見的檢(jiǎn)測器(qì)有(yǒu)紫外檢(jiǎn)測(cè)器(qì),熒(yíng)光檢測器(qì),示差折光(guāng)檢(jiǎn)測(cè)器(qì)等(děng)。紫外檢測(cè)器(qì)因其廣譜性和(hé)靈敏度(dù)而廣泛(fàn)使用,能夠檢測大(dà)多(duō)數有機化(huà)合(hé)物。
 
  4. 餾(liù)分收(shōu)集器:用於(yú)收集經(jīng)過色(sè)譜柱(zhù)分離(lí)後(hòu)的各(gè)組(zǔ)分。根據需要(yào),可以選擇手(shǒu)動(dòng)或(huò)自動(dòng)餾(liù)分(fēn)收(shōu)集器。自動餾分收(shōu)集(jí)器能夠根據(jù)檢(jiǎn)測(cè)器(qì)的(dí)信號自動(dòng)收(shōu)集特定(dìng)組(zǔ)分(fēn),提高實驗(yàn)效率(shuài)和(hé)準確性。
 
  5. 控(kòng)製係統(tǒng):負(fù)責(zé)整(zhěng)個係(xì)統的自(zì)動化操(cāo)作,包(bāo)括(kuò)泵的(dí)流(liú)速控製,檢(jiǎn)測器(qì)的數(shù)據采集(jí),餾(liù)分(fēn)收集器的(dí)自動控(kòng)製等(děng)。現代HPLC儀(yí)還(huán)配(pèi)備有微機控製係統,能夠(gòu)實(shí)現(xiàn)儀器的(dí)精確(què)控製和(hé)數(shù)據處(chǔ)理。
 
  製備液(yè)相(xiāng)色譜係(xì)統(tǒng)的(dí)工作(zuò)原(yuán)理如下:
 
  1.高壓(yā)驅(qū)動:高(gāo)壓泵將流動相以高(gāo)壓形式輸(shū)送到(dào)色譜柱,使樣品在高壓下通過色譜(pǔ)柱。高壓的作(zuò)用(yòng)可(kě)以使樣(yàng)品(pǐn)中(zhōng)各組分的有(yǒu)效擴散(sàn)距離增大,從而提高分離效果(guǒ)。
 
  2.樣(yàng)品(pǐn)分(fēn)離(lí):樣(yàng)品(pǐn)在高(gāo)壓(yā)作用下(xià)通(tōng)過色譜柱,由於(yú)不同(tóng)組(zǔ)分(fēn)在(zài)固(gù)定(dìng)相和流(liú)動相中(zhōng)的吸(xī)附,分配,離子(zǐ)交換(huàn)等作用的(dí)差(chà)異(yì),實現對(duì)復雜樣(yàng)品(pǐn)中各組(zǔ)分的(dí)分離。
 
  3.檢測(cè)與(yǔ)定量:經(jīng)過色(sè)譜柱分(fēn)離後的樣(yàng)品(pǐn)組分被(bèi)檢測器(qì)檢(jiǎn)測(cè),並將其轉化(huà)為電信(xìn)號。通過對電(diàn)信號(hào)的(dí)處理(lǐ)和分(fēn)析,可(kě)以實(shí)現對樣品中各組分的定量(liáng)分(fēn)析(xī)。
 
  4.餾分(fēn)收集:根(gēn)據檢測(cè)器的信(xìn)號,控製係統可以(yǐ)自動(dòng)控製(zhì)餾(liù)分收(shōu)集(jí)器的(dí)工作,實現對(duì)分離(lí)後各組(zǔ)分的自(zì)動(dòng)收集(jí)。