製備液相(xiāng)流(liú)動相(xiāng)通(tōng)過高壓(yā)泵(bèng)進入(rù)係統，樣品(pǐn)溶(róng)液通(tōng)過注(zhù)射(shè)器(qì)進入流動相，流動相加(jiā)載到色譜柱（固(gù)定相）中。由於樣品溶(róng)液(yè)中(zhōng)各組分(fēn)在兩(liǎng)相中(zhōng)的(dí)分配係數不同，經(jīng)過兩(liǎng)相反(fǎn)復(fù)吸(xī)附－解(jiě)吸分配後，各組分的運(yùn)動速(sù)度(dù)有很(hěn)大(dà)的不同。它(tā)被(bèi)分(fēn)離成一(yī)個(gè)單獨的(dí)組件，然後依次從(cóng)列(liè)中(zhōng)流出。當樣(yàng)品(pǐn)濃度(dù)通(tōng)過檢(jiǎn)測(cè)器時，樣(yàng)品濃度(dù)被(bèi)轉換成(chéng)電(diàn)信(xìn)號並傳送給(gěi)記(jì)錄器(qì)，數據(jù)以(yǐ)地(dì)圖(tú)的形式打印(yìn)出(chū)來。
製備(bèi)液相(xiāng)溶(róng)於流動(dòng)相中(zhōng)的各組分經(jīng)過(guò)固(gù)定相時，由於與(yǔ)固定相發生(shēng)作用（吸(xī)附，分配(pèi)，排阻(zǔ)，親和(hé)）的(dí)大小(xiǎo)，強(qiáng)弱不同(tóng)，在固(gù)定(dìng)相中滯留(liú)時(shí)間(jiān)不同，從而先後從固定相(xiāng)中(zhōng)流(liú)出。又(yòu)稱為色(sè)層法，層析(xī)法。
液相色譜是(shì)現在食(shí)品(pǐn)實驗室(shì)中應用非常廣泛的(dí)一(yī)款儀(yí)器，但是還有(yǒu)很多小夥(huǒ)伴(bàn)對它(tā)的(dí)原理，使用(yòng)維護等知識(shí)不(bù)太(tài)了解。今天(tiān)小編(biān)就從(cóng)HPLC概述(shù)，工作原理，結(jié)構(gòu)組(zǔ)成，常見(jiàn)故障及(jí)維(wéi)護，HPLC應(yīng)用等方(fāng)麵來(lái)給(gěi)大家科(kē)普下HPLC的基礎知(zhī)識。
色譜(pǔ)圖其實(shí)簡單地講是一(yī)個(gè)橫坐標是時(shí)間(jiān)縱坐標(biāo)是(shì)電信號(hào)的二(èr)維圖譜。液相色(sè)譜法，你可(kě)以(yǐ)簡(jiǎn)單地想象，固定(dìng)相(xiāng)是(shì)一個多空(kōng)海綿狀(zhuàng)的柱(zhù)形(xíng)結(jié)構，樣品在(zài)孔洞中(zhōng)進進出出(chū)。因為各(gè)個物質的吸(xī)附能力不(bù)同(tóng)，所(suǒ)以才會(huì)在色(sè)譜(pǔ)圖中拉(lā)開(kāi)距(jù)離。
對於(yú)樣品(pǐn)汙(wū)染沉積(jī)，先用40～50度的(dí)純水，低(dī)速正(zhèng)向(xiàng)衝(chōng)洗(xǐ)柱子待柱壓逐(zhú)漸下降(jiàng)後，相應的提(tí)高(gāo)流速(sù)衝洗(xǐ)柱(zhù)壓(yā)大幅度下(xià)降後(hòu)，用常溫純水(shuǐ)衝洗，之後用純(chún)甲醇(chún)衝洗(xǐ)柱(zhù)子(zǐ)30分(fēn)鐘(zhōng)，對(duì)於第(dì)2種情況，由樣品(pǐn)的沉積引起(qǐ)汙染的C18柱(zhù)，和(hé)純(chún)水反向(xiàng)衝洗柱子，然後(hòu)換成甲醇衝(chōng)洗，接著(zhuó)用(yòng)甲醇＋異(yì)丙醇（4＋6）衝洗柱(zhù)子（衝洗(xǐ)時(shí)間(jiān)的(dí)長短由(yóu)樣品的(dí)汙染情況(kuàng)而(ér)定(dìng)），在用換成(chéng)甲醇衝(chōng)洗，然後(hòu)用純水衝洗，然後甲(jiǎ)醇(chún)衝(chōng)洗(xǐ)，正(zhèng)向(xiàng)衝洗柱子30分鐘(zhōng)以上。
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