蛋白質是(shì)生(shēng)命活動的物質基礎，也是生物體內的功能(néng)性大分子(zǐ)。隨(suí)著分(fēn)子生物學，結(jié)構生(shēng)物(wù)學(xué)，生物(wù)製藥行業等研究的(dí)不斷深入，蛋白質純化成為(wéi)近年(nián)來越來越(yuè)熱的研究話題。
蛋(dàn)白(bái)的(dí)純化(huà)大(dà)致分為粗分(fēn)離(lí)階段(duàn)和精細純(chún)化(huà)階段兩個(gè)階(jiē)段。粗分離階段(duàn)主(zhǔ)要(yào)將目的蛋(dàn)白(bái)和其他(tā)細(xì)胞(bāo)成分如(rú)RNA，DNA等分(fēn)開，常(cháng)用(yòng)的(dí)方(fāng)法為硫酸銨沉澱(diàn)法(fǎ)。精細(xì)純化(huà)階段(duàn)的目的(dí)是(shì)把目的(dí)蛋(dàn)白與(yǔ)其(qí)他(tā)大小(xiǎo)及理(lǐ)化性質(zhì)接近的(dí)蛋(dàn)白(bái)區分開來(lái)，常用(yòng)的(dí)方法(fǎ)有(yǒu)：凝(níng)膠(jiāo)過濾層析(xī)，離子交(jiāo)換層(céng)析，疏(shū)水(shuǐ)層(céng)析，親(qīn)和層析等。
1：耐壓高(gāo)，透明
2：快(kuài)速(sù)鎖(suǒ)定的適(shì)配器(qì)確(què)保(bǎo)均一的(dí)流速和(hé)小的(dí)死體(tǐ)積(jī)
3：特定的(dí)裝柱器保證好的(dí)柱(zhù)效
4：材(cái)質有(yǒu)很(hěn)好的(dí)化(huà)學耐(nài)受性(xìng)
5：熱(rè)穩定的夾套(tào)可維持一定(dìng)的操作溫度
蛋白層析柱的(dí)工(gōng)作(zuò)流(liú)程：
1.預處理：在吸(xī)附樹(shù)脂(zhī)的(dí)生產過程中(zhōng)，一般(bān)采用的是(shì)工業級原(yuán)料，產品沒有(yǒu)經(jīng)過(guò)進(jìn)一步(bù)純(chún)化(huà)處理(lǐ)，樹脂內部殘留(liú)少量單體，所以在(zài)使用之(zhī)前，需用水溶(róng)性(xìng)溶劑(jì)對(duì)其浸(jìn)泡處(chǔ)理，然後用(yòng)去(qù)離(lí)子(zǐ)水(shuǐ)通過樹脂層(céng)，置換出水溶(róng)性(xìng)溶劑離子方可(kě)投入(rù)使用(yòng)。
2.逆流(liú)洗柱：用水洗(xǐ)出去水(shuǐ)離子及(jí)破碎(suì)填(tián)料，樹脂(zhī)裝入後，用蒸餾水反洗(xǐ)樹脂(zhī)層(céng)，直至(zhì)出水清晰，無氣味，無細碎樹(shù)脂(zhī)為(wéi)止。再(zài)依次(cì)用(yòng)酸(suān)鹼(jiǎn)等浸泡(pào)，衝(chōng)洗(xǐ)樹(shù)脂(zhī)層(céng)，至(zhì)出水(shuǐ)呈中性為止。
3.水洗(xǐ)：水洗(xǐ)的主要(yào)目(mù)的(dí)是除去層(céng)析(xī)柱(zhù)上所附著(zhuó)的渣(zhā)滓(zǐ)。
4.吸附：吸附操作(zuò)自上而(ér)下(或自下(xià)而上(shàng))通液，可采用不同流速，以(yǐ)選(xuǎn)取條(tiáo)件。流(liú)出(chū)液(yè)每隔一(yī)段時間取(qǔ)樣檢測，達(dá)泄漏點停止(zhǐ)吸(xī)附(fù)，或(huò)多柱串聯達(dá)飽和(hé)後解(jiě)吸。吸附(fù)主要(yào)是吸取(qǔ)料(liào)液中的(dí)渣滓或(huò)要回(huí)收(shōu)物，該(gāi)過程應控製料(liào)液(yè)的速度及(jí)吸附量(liáng)，大孔樹(shù)脂應*浸泡在料液裏，以提(tí)高(gāo)吸附(fù)效果(guǒ)和運行穩(wěn)定性。
5.解(jiě)吸(xī)，再(zài)生(shēng)：解(jiě)吸操作自上而下(或自下而上(shàng))通(tōng)解吸(xī)劑，單(dān)柱(zhù)吸附時(shí)，解(jiě)吸(xī)與吸附(fù)操(cāo)作對(duì)流(liú)為佳。解(jiě)吸(xī)劑(jì)沸點要低(dī)以便回收(shōu)處理。
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