蛋白(bái)層析柱(zhù)使用減(jiǎn)壓洗(xǐ)脫，避免了(liǎo)加(jiā)壓洗(xǐ)脫(tuō)時玻璃柱(zhù)爆(bào)炸的(dí)危(wēi)險(xiǎn)。另外，柱(zhù)子是用預定量的溶(róng)劑(jì)洗脫(tuō)，把溶(róng)劑流幹直(zhí)至(zhì)再(zài)加洗脫劑。這些特性，使(shǐ)得幹法快速柱層(céng)析技(jì)術(shù)特別(bié)適(shì)合梯(tī)度洗(xǐ)脫(tuō)。事實上，這也(yě)是開(kāi)發(fā)此類層(céng)析(xī)柱(zhù)的常(cháng)選方式(shì)。顧名(míng)思義(yì)，梯度(dù)洗脫使(shǐ)用的(dí)使極性(xìng)逐漸(jiàn)增(zēng)加的溶劑(jì)洗脫(tuō)。
需要的設備很簡(jiǎn)單，就(jiù)是把(bǎ)減壓抽(chōu)濾(lǜ)所用(yòng)的圓(yuán)柱形多(duō)孔漏鬥(dǒu)，通(tōng)過一個錐形插口(kǒu)轉換頭(tóu)連(lián)接(jiē)到一個圓底燒瓶上(shàng)，另外(wài)側邊(biān)的(dí)一個(gè)插口連接到水泵(bèng)。要純化的樣品(pǐn)量(liáng)決定了使用的(dí)漏鬥的大小和(hé)洗(xǐ)脫液的接收體積(jī)。
蛋白層(céng)析(xī)柱幹法裝柱是(shì)在一(yī)個層析(xī)柱中直(zhí)接(jiē)加入矽膠(jiāo)，填(tián)充到你需要的高(gāo)度，然後(hòu)向其(qí)中加入(rù)石油醚，讓溶(róng)劑*浸潤矽膠，直(zhí)至下端流出。在確保(bǎo)不會(huì)幹(gān)的前提(tí)下，上(shàng)麵可(kě)以(yǐ)加壓(yā)，讓(ràng)矽膠(jiāo)填(tián)充(chōng)更緊密。
這樣反(fǎn)復(fù)操作(zuò)幾次，完成(chéng)裝(zhuāng)柱(zhù)。濕(shī)法裝柱(zhù)是(shì)先將需要的矽(guī)膠(jiāo)加入到一個燒杯(bēi)中，然(rán)後(hòu)加入石(shí)油醚，攪(jiǎo)拌除去矽膠(jiāo)中的氣泡(pào)，然(rán)後將矽膠(jiāo)的懸濁(zhuó)液加入(rù)到(dào)層析(xī)柱中，加(jiā)壓(yā)讓(ràng)多(duō)餘(yú)溶劑(jì)從下端流出(chū)，完(wán)成(chéng)裝柱(zhù)。
幹法(fǎ)裝柱速(sù)度比較快(kuài)，但不(bù)太容易(yì)裝緊密，適合(hé)快速分(fēn)離那些(xiē)分離(lí)度較高或(huò)者隻有一個(gè)點(diǎn)的樣品。濕法(fǎ)裝柱速度慢，但是(shì)柱子比較(jiào)緊密，適合分(fēn)離較難(nán)分的樣(yàng)品。而(ér)且濕(shī)法(fǎ)裝柱(zhù)可以預先(xiān)在(zài)拌矽(guī)膠的時(shí)候加入三乙胺(àn)之類的(dí)，中(zhōng)和矽膠的微量(liáng)酸(suān)性(xìng)，對於分離那些矽膠(jiāo)中(zhōng)容易(yì)分解(jiě)變(biàn)雜的(dí)化合(hé)物很(hěn)有(yǒu)效(xiào)。
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