製(zhì)備(bèi)液相(xiāng)色譜是色譜法的一(yī)個(gè)重(zhòng)要分支，以液(yè)體為(wéi)流(liú)動相，采用高壓輸液(yè)係統，將(jiāng)具(jù)有不(bù)同極(jí)性(xìng)的單一溶劑或不(bù)同比例的混(hùn)合溶劑(jì)，緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)等流動相泵入裝有固(gù)定(dìng)相(xiāng)的(dí)色譜柱，在柱內各成分(fēn)被(bèi)分(fēn)離(lí)後(hòu)，進(jìn)入(rù)檢測器進行檢測，從(cóng)而實現對試樣的分(fēn)析。該方法(fǎ)已成為化學(xué)，醫(yī)學，工業(yè)，農學，商檢和法檢等(děng)學科(kē)領(lǐng)域中(zhōng)重要(yào)的分離分(fēn)析技(jì)術(shù)應(yīng)用。
一般(bān)柱(zhù)長在(zài)2—250mm，柱(zhù)越(yuè)長(cháng)，分(fēn)離度(dù)越高(gāo)，但柱(zhù)壓更高(gāo)，分(fēn)離所需(xū)時間(jiān)更長;但分離度(dù)與理論塔(tǎ)板數的平方根(gēn)成正比(bǐ)，所(suǒ)以一(yī)昧增(zēng)加(jiā)柱(zhù)長並(bìng)不是zui有效的分離手(shǒu)段，一(yī)般情況下，150mm，5um的(dí)填料可以(yǐ)提供(gōng)足(zú)夠(gòu)的塔板數。
正相(xiāng)色譜(pǔ)n流動相極性小於固(gù)定(dìng)相極性的(dí)分配色譜(pǔ)法稱為(wéi)正相(xiāng)分(fēn)配(pèi)色(sè)譜(pǔ)。常用的(dí)分析(xī)柱有(yǒu)：n氨基柱(zhù)，氰基(jī)柱，矽膠(jiāo)柱(zhù)。n常用(yòng)流(liú)動(dòng)相(xiāng)為(wéi)極(jí)性小的(dí)有(yǒu)機(jī)溶劑。反相(xiāng)色譜n流動(dòng)相(xiāng)極(jí)性大於固定相極性的分配(pèi)色譜法(fǎ)稱為反(fǎn)相(xiāng)分(fēn)配(pèi)色(sè)譜法。常用的(dí)分析柱有(yǒu)：ODS(C18)，C8，C2。n常用流動(dòng)相為甲醇-水，乙腈-水。
空間排斥(chì)色(sè)譜n也稱(chēng)凝膠(jiāo)色(sè)譜(pǔ)，依據(jù)被分離組分分子尺寸與(yǔ)凝膠空(kōng)徑(jìng)大小之(zhī)間(jiān)的相對關係而(ér)分(fēn)離，類似於分子(zǐ)篩作用。在一(yī)定分子綫(xiàn)團(tuán)尺(chǐ)寸內(nèi)，分子越大(dà)，保(bǎo)留時間越短(duǎn)。凝(níng)膠滲(shèn)透(tòu)——以(yǐ)有機(jī)溶劑為流(liú)動相凝(níng)膠過濾(lǜ)——以水溶液為流(liú)動相對於(yú)相同(tóng)化(huà)學組成的高分(fēn)子(zǐ)化(huà)合(hé)物，其分子尺(chǐ)寸大小與(yǔ)分(fēn)子(zǐ)量成(chéng)正比(bǐ)，因此凝膠色譜(pǔ)可(kě)以研(yán)究高分子化合(hé)物的分(fēn)子(zǐ)量(liáng)分布(bù)。
製備(bèi)液相色(sè)譜時(shí)，配製(zhì)流(liú)動相應用新鮮水(shuǐ)，水質要求(qiú)越(yuè)高放置(zhì)時間(jiān)越短(duǎn)。理(lǐ)想的(dí)HPLC用(yòng)水(shuǐ)應(yīng)為(wéi)0.055μS/cm的超純水，並(bìng)通(tōng)過(guò)0.22μm的濾膜(mó)，除去熱(rè)源，有(yǒu)機物(wù)，無(wú)機(jī)離子(zǐ)及(jí)空氣等(děng)。
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