製(zhì)備液相(xiāng)色譜是色(sè)譜(pǔ)法(fǎ)的一個(gè)重要分支,以液體為流動相,采用(yòng)高(gāo)壓(yā)輸(shū)液係(xì)統,將(jiāng)具有(yǒu)不(bù)同極性(xìng)的(dí)單(dān)一溶劑(jì)或不(bù)同(tóng)比例(lì)的混合(hé)溶劑(jì),緩衝液(yè)等流動相泵入裝有固定相的色譜柱(zhù),在(zài)柱內(nèi)各成分被(bèi)分離後,進入(rù)檢測器進行檢(jiǎn)測,從(cóng)而(ér)實現(xiàn)對試(shì)樣(yàng)的分(fēn)析。
製(zhì)備液(yè)相(xiāng)色(sè)譜還(huán)有(yǒu)色譜柱可反(fǎn)復(fù)使(shǐ)用(yòng),樣品(pǐn)不(bù)被(bèi)破壞,易(yì)回收等(děng)優點,但也(yě)有缺點(diǎn),與(yǔ)氣相色譜(pǔ)相(xiāng)比(bǐ)各(gè)有(yǒu)所長,相互(hù)補充(chōng)。液(yè)相色譜的(dí)缺點(diǎn)是(shì)有“柱(zhù)外效應”。在從(cóng)進(jìn)樣到檢測器之間,除了柱子(zǐ)以外(wài)的任何死空(kōng)間(jiān)(進樣器(qì),柱接(jiē)頭,連接(jiē)管和(hé)檢測池等)中,如(rú)果流(liú)動(dòng)相(xiāng)的(dí)流型(xíng)有(yǒu)變(biàn)化(huà),被分離(lí)物質的任(rèn)何擴散和(hé)滯留(liú)都會(huì)顯著地(dì)導(dǎo)致色(sè)譜(pǔ)峰(fēng)的加寬,柱(zhù)效率降(jiàng)低。液相色譜檢(jiǎn)測(cè)器的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)不及氣相(xiāng)色(sè)譜。
在柱(zhù)層析中(zhōng),溶劑(jì)在重(zhòng)力作(zuò)用下滴入(rù)裝(zhuāng)有(yǒu)吸(xī)附劑的色(sè)譜柱(zhù)中。液相(xiāng)色譜(pǔ)是一種改進的(dí)柱(zhù)色譜(pǔ)。在高達400個大氣(qì)壓(yā)的(dí)高(gāo)壓下(xià),泵(bèng)輸(shū)送溶劑(jì)通過色譜(pǔ)柱。柱(zhù)吸附劑(jì)或固定(dìng)相通(tōng)常是(shì)由(yóu)固體顆粒(如二氧化(huà)矽或(huò)聚(jù)合(hé)物)製(zhì)成的顆粒(lì)材(cái)料(liào)。
與(yǔ)柱色譜(pǔ)相比,利(lì)用泵輸送,不僅可(kě)以(yǐ)快速(sù)分析,而且(qiě)可(kě)以(yǐ)使(shǐ)用更(gēng)小(xiǎo)的顆粒作(zuò)為(wéi)柱(zhù)填料。粒(lì)子越小(xiǎo),其表麵積更大(dà),通過(guò)固定相(xiāng)與(yǔ)流動相及樣(yàng)品組(zǔ)分之間(jiān)的(dí)相互作用(yòng),可以更好(hǎo)地(dì)實現(xiàn)混合(hé)物中各(gè)組(zǔ)分分離。流動相(xiāng)通(tōng)常是溶(róng)劑(如水,乙(yǐ)腈(jīng),甲(jiǎ)醇(chún))的混(hùn)合(hé)物。
提(tí)高(gāo)液相(xiāng)色(sè)譜中柱效的(dí)有效途徑有:減小填料粒徑(jìng),增加(jiā)色譜柱(zhù)長,使(shǐ)用(yòng)盡量大小均一(yī),外(wài)型(xíng)規(guī)則的填(tián)料,使(shǐ)用(yòng)合(hé)適的流(liú)速(sù),使用合(hé)適(shì)的(dí)流動相組成(chéng),使用(yòng)合適的固(gù)定相(xiāng)。