液相色(sè)譜儀隻(zhī)要求(qiú)樣品能製成(chéng)溶(róng)液,不受樣(yàng)品(pǐn)揮發(fā)性的限(xiàn)製,流動(dòng)相可選(xuǎn)擇的(dí)範圍(wéi)寬,固(gù)定相的(dí)種類(lèi)繁多,因而(ér)可以(yǐ)分(fēn)離熱不穩定和(hé)非揮(huī)發性(xìng)的,離解(jiě)的(dí)和非(fēi)離解(jiě)的以(yǐ)及各(gè)種分子量範圍(wéi)的物質(zhì)。
液(yè)相色譜儀(yí)在(zài)條件:流(liú)動相,固定相,溫度(dù)和(hé)壓力等一定(dìng)時,樣(yàng)品(pǐn)濃度很低時(shí)Cs,Cm很(hěn)小(xiǎo)時(shí),K隻取(qǔ)決於組分的(dí)性質,而(ér)與濃度無關(guān)。這(zhè)隻是理想(xiǎng)狀態(tài)下(xià)的色(sè)譜(pǔ)條(tiáo)件(jiàn),在這種(zhǒng)條(tiáo)件(jiàn)下,得(dé)到(dào)的色(sè)譜(pǔ)峰為正(zhèng)常峰;在(zài)許(xǔ)多情(qíng)況(kuàng)下(xià),隨著濃度的(dí)增加(jiā),K減小(xiǎo),這時色譜(pǔ)峰為(wéi)拖尾峰(fēng);而有(yǒu)時隨(suí)著(zhuó)溶質(zhì)濃度(dù)增加,K也(yě)增(zēng)加(jiā),這時(shí)色譜峰(fēng)為前延峰。因(yīn)此(cǐ),隻(zhī)有盡可(kě)能(néng)減少(shǎo)進樣量(liáng),使組分(fēn)在柱內濃度降(jiàng)低(dī),K恒定(dìng)時,才(cái)能獲(huò)得(dé)正(zhèng)常峰。
而出(chū)現峰展(zhǎn)寬的時候就要(yào)注(zhù)意(yì)了,可(kě)能(néng)是(shì)以下(xià)原(yuán)因:
1,流動(dòng)相(xiāng)粘度(dù)過(guò)高
2,色(sè)譜(pǔ)柱汙染(rǎn)或失(shī)效,柱(zhù)效太(tài)低
3,進(jìn)樣(yàng)體積過大
4,呈現(xiàn)兩(liǎng)個(gè)或多個(gè)未被(bèi)*分(fēn)離的峰(fēng)
5,保留時(shí)間(jiān)過長
6,柱(zhù)溫(wēn)過低(dī)
7,樣品(pǐn)超載
8,保護(hù)柱(zhù)汙(wū)染(rǎn)或失效(xiào)
9,柱外(wài)體積過大
10,緩衝液溶(róng)度(dù)太低
解(jiě)決(jué)方(fāng)法也(yě)很簡單(dān):
1,清(qīng)洗或(huò)更換(huàn)色譜柱(zhù)
2,減(jiǎn)小進樣體積
3,等(děng)度(dù)洗脫時(shí)增(zēng)加強溶劑(jì)濃度(dù),或(huò)采(cǎi)用(yòng)梯度洗脫(tuō)
4,選擇其(qí)他色譜柱改(gǎi)善分離效果(guǒ)
5,稀釋(shì)樣品,或采用小(xiǎo)體積(jī)進樣(yàng)
6,檢查各(gè)接頭處的連接(jiē),避免死(sǐ)體積形成
7,增(zēng)加濃(nóng)度
8,適當提(tí)高柱溫
9,更換(huàn)保護柱
10,增加柱溫,采用(yòng)低(dī)粘度流(liú)動相(xiāng)